細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

SH-SY5Y 細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持SH-SY5Y 細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含 SH-SY5Y 細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于SH-SY5Y 細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

MEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                                215ml

Ham's F-12 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                      215 ml

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠腺病毒(ADV)pcr檢測試劑盒

Rat Leptospira IgG (Lebtospira) ELISA Kit 大鼠鉤端IgG(Lebtospira)試劑盒

Humanisociatedehydrogenase,ICDELISAKit 人異檸檬酸脫輕酶(ICD)pcr檢測試劑盒分裝

ChickenEpidermalgrowthfactor,EGF試劑盒雞表皮生長因子(EGF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞CASPASE-3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MousehepatitisBviruseaigen,HBeAgELISAKit小鼠乙型肝e抗原(HBeAg)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠泛素連接酶(E3/UBPL)試劑盒 ，英文名： E3/UBPL ELISA Kit

Pig phosphorylation of exacellular signal regulated kinase (pERK) ELISA Kit 豬0酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)試劑盒

羊特定基因序列(Ovine)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMAdCAM-1(Humanmucosaladdressincelladhesionmolecule-1)ELISAKit人黏膜地址素細(xì)胞黏附分子

體液乙酰酯酶活性比色法定量試劑盒20次

ELISAKitVTG鯉魚卵黃蛋白原

小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子C(VEGF-C)試劑盒

小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B(VEGF-B)試劑盒

小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)試劑盒

小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)換酶（ACE）試劑盒

RNA（9）甲基轉(zhuǎn)移酶結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體

LRP1B小鼠單克隆抗體

HA重組甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

SCN9A/NAV1.7(Sodium channel protein type 9 subunit alpha 0.5mgSCN9A/NAV1.7(Sodium channel protein type 9 subunit alpha) 電壓開啟的離子通道SCN9A抗原

GCK重組人 Glucokinase / GCK 蛋白 Prote???????

SH-SY5Y 細(xì)胞專用培養(yǎng)基SCN9A/NAV1.7(Sodium channel protein type 9 subunit alpha 0.5mgSCN9A/NAV1.7(Sodium channel protein type 9 subunit alpha) 電壓開啟的離子通道SCN9A抗原

CD8B Protein Human 重組人 CD8B / P37 / LEU2 蛋白

HA重組甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

IL1RL1 Protein Human 重組人 IL1RL1 / DER4 蛋白

GCK重組人 Glucokinase / GCK 蛋白 Protein